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本文目录一览:
- 1、细胞核重编程的介绍
- 2、细胞核重编程的背景理论知识
- 3、传代细胞的培养步骤
细胞核重编程的介绍
1、这些方法都是利用细胞核重编程的原理,也就是说让一种类型细胞的核基因表达转变成为胚胎细胞或者其它类型细胞的状况。这一机制引起了科学界的广泛兴趣。
2、通过这一技术,可以在同一个体上将较容易获得的细胞(如皮肤细胞)类型转变成另一种较难获得的细胞类型(如脑细胞)。这一技术的实现将能避免异体移植产生的免疫排斥反应。
3、体细胞重编程的经典方案有四种:体细胞核移植、转录因子诱导、细胞融合、细胞质孵育。(somatic cell reprogram-ming)。
细胞核重编程的背景理论知识
1、用卵子进行细胞核重编程值得关注的一个地方是卵子具有以100%的效率重编程已经定向分化了的***细胞核的能力。
2、细胞核重编程指的是细胞内的基因表达由一种类型变成另一种类型。早期对青蛙克隆的研究为重编程提供了初步的实验证据,之后的证据则包括体细胞核移植、细胞融合、外源基因诱导的重编程以及直接重编程。
3、直接重编程涉及将像皮肤细胞这样的一种特化细胞诱导成为如内皮细胞这样的一种细胞分化类型,无需通过中间的多能状态。斯坦福的研究人员Marius Wernig博士利用直接重编程成功地将人类皮肤细胞转变为了功能性的神经元。
4、通过这一技术,可以在同一个体上将较容易获得的细胞(如皮肤细胞)类型转变成另一种较难获得的细胞类型(如脑细胞)。这一技术的实现将能避免异体移植产生的免疫排斥反应。
传代细胞的培养步骤
也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。 传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。
观察培养基是否正常,细胞状态如何,细胞密度如何,决定是否传代。观察时拧紧盖子。加热PBS、versene、培养基,(提前做好) 瓶子不要倒着放,不要让液体接触到瓶塞。
悬浮细胞可***用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用离心法后,加入新培养基后再吹打分散进行传代 贴壁细胞实验需准备超净台喷洒酒精,紫外照射30min。
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